elisa檢測(cè)試劑盒總是需要時(shí)刻保溫,主要因?yàn)镋LISA屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例,參加板孔中的標(biāo)本,其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結(jié)合的時(shí)機(jī),只需靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個(gè)逐步平衡的進(jìn)程,因而需經(jīng)分散才干到達(dá)反響的終點(diǎn)。
在elisa檢測(cè)試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反響的完結(jié)需求有一定的溫度和時(shí)刻,這一保溫進(jìn)程稱為溫育,有人稱之為孵育.
一、沖洗式
初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來(lái)水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗,持續(xù)沖洗 2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡(jiǎn)便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
二、浸泡式
1、吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;
2、用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
3、浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動(dòng),浸泡時(shí)間不可隨意縮短;
4、吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
5、重復(fù)操作c和d,洗滌3-4次(或按說(shuō)明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間。
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